描寫的是一對孿生姊妹(胡蝶兼飾)的不同遭遇。妹妹二寶自幼跟隨私販洋槍的父親逃往城市,長大以后被父親送給了軍閥錢督辦做姨太太;姐姐大寶則和母親(宣景琳飾)一起住在鄉(xiāng)下,后來嫁給一個窮苦的木匠桃哥(鄭小秋飾),父母姊妹不通音訊,彼此不知下落。十多年后,大寶夫婦和母親從鄉(xiāng)下流落到城市。桃哥去做工,大寶拋下未滿月的孩子,到錢督辦的公館去當(dāng)奶媽,她帶的正好是二寶的孩子。二寶作為主婦,對大寶非常冷淡,甚至因為大寶外貌酷似自己而感到反感;大寶為了保住飯碗,只好盡心服侍小主人。一天,桃哥干活時摔傷,無錢醫(yī)治,大寶便懇求二寶預(yù)支一點工錢,但二寶非但不肯,反而打了大寶一記耳光。大寶為了救治丈夫,便竊取了小主人的金鎖片,不巧又被錢督辦的妹妹撞見,大寶失手碰倒花瓶,致使錢妹遭誤傷而亡,大寶即以殺人罪入獄。大寶入獄后,母親前來探監(jiān),才發(fā)現(xiàn)主辦大寶一案的軍法處長正是遺棄自己多年的丈夫。丈夫在妻子的憤怒斥責(zé)和要求下,安排妻子和大寶、二寶會面。真相大白后,二寶終于為母親和姐姐的苦難遭遇所感動,不顧父親勸阻,帶領(lǐng)她們驅(qū)車前往錢督辦處求情。1934年,《姊妹花》被評選為最佳有聲片;1935年,《姊妹花》曾和《漁光曲》等影片一起被推薦參加莫斯科電影節(jié)展映。